聯系電話:
15821734033
HaCaT細胞,人永生化表皮細胞形態
產品名稱:HaCaT細胞
中文名稱:人永生化表皮細胞
來源:人皮膚
類別:類屬于正常細胞
細胞形態:上皮樣
生長狀態:貼壁生長
培養基:DMEM 90%, Fetal Bovine Serum 10%
培養條件:37℃,5% CO2
消化條件:0.25% (w/v) Trypsin-0.03%(w/v) EDTA 溶液,消化 5-10min
主營細胞:DC2.4細胞,HOS細胞,3D4/21細胞,HCAEC細胞,Tca-8113細胞,NCI-H460細胞,MCF-7細胞,U251細胞
消化比例:1:4-1:10
換液時間:2-3 天換液一次
凍存液比例:85%培養基,10%FBS,5% (v/v) DMSO
凍存密度:1-3 ×10^6/管,液氮保存
主營細胞:CNE細胞,MADB-106細胞,Sf9細胞,HOC細胞,3T3-L1細胞,THP-1細胞。
若客戶收到2ml小管HaCaT細胞,人永生化表皮細胞形態
收到細胞以后,用75%酒精噴灑整個管子消毒后放到超菌臺內,嚴格無菌操作;然后將小管細胞轉移至T25培養瓶,加入5ml左右含FBS的培養基混勻,放入培養箱隔夜培養后查看細胞匯合度:若未超過80%匯合度,換液繼續培養,根據情況傳代或者凍存。若超過80%匯合度,可直接進行傳代(細胞貼壁處理方法)。
1、細胞在培養瓶中培養至良好狀態后灌滿*培養液并封好瓶口是細胞運輸的辦法。從細胞資源中心獲得細胞回到自己的實驗室后,先打開外包裝,用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超凈臺內,嚴格無菌操作。
2、鏡下觀察:將瓶裝的*培養液移入無菌瓶中,留待日后培養用,原瓶(T25瓶)保留6-8ml*培養液,放入37℃、5%CO2孵箱培養;超過80%匯合度時,按要求比例消化傳代。(收到細胞,建議棄去原基培養,使用新鮮*培養基培養)
3、消化方法:
1、將瓶裝的*培養液移入無菌瓶中,留待日后培養用。加消化液0.25% Trypsin-EDTA (1X), Phenol Red消化。(收到細胞,建議棄去原基培養,使用新鮮*培養基培養)
2、T25瓶加3ml PBS,洗一次,棄上清,再加1ml消化液消化,顯微鏡下觀察,等細胞*脫離瓶壁分離成單個后,加培養基混勻,離心收集,按要求分瓶(視細胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6, 1:6-1:8),每T25瓶加培養基至6-8ml,37℃、5%CO2孵箱培養。
慧穎生物購買HaCaT細胞,人永生化表皮細胞形態注意事項:
1、客戶在收到細胞時,請首先觀察培養瓶是否完好,培養液是否外滲,培養液是否混濁。如發現有瓶破、滲漏、培養液混濁等問題,請在收到細胞后立即與我們 王。
2、由于運輸過程中的問題,細胞培養瓶中的貼壁細胞有可能從瓶壁中脫落下來,顯微鏡下觀察會出現細胞懸浮的情況,出現此狀態時,請離心收集,重懸細胞,置培養箱培養,細胞會重新貼附于瓶壁。如果細胞仍不能貼壁,請用臺盼藍染色法鑒定細胞活力。
3、收到細胞時如無異常情況,請按照細胞處理方法處理細胞。
細胞株、Hs578Bst細胞、ND7/23細胞、bel-7407細胞、EA.hy926細胞、A2780細胞、人肝癌細胞株、RAW264.7細胞、NB4細胞、Sp2/0細胞、KYSE30細胞